伯樂CFX Connect 是繼CFX96 Touch之后，在2012年推出的具有三個熒光檢測通道的基礎(chǔ)型實(shí)時熒光定量PCR儀（注：CFX Connect已于2022年5月停產(chǎn)，由新款CFX Duet取代）。它沿用了伯樂熒光信號光學(xué)檢測單元、PCR熱循環(huán)反應(yīng)模塊二合一結(jié)構(gòu)設(shè)計，可實(shí)現(xiàn)在一個循環(huán)中進(jìn)行2重?zé)晒釶CR反應(yīng)（multiplex real-time PCR assay, multiplex quantitative PCR， multiplex qPCR和羅氏 FRET雙雜交熒光探針檢測。可用于核酸定量（nucleic acid quantification，如SARS-CoV-2感染篩查與診斷）、基因表達(dá)水平分析（gene expression analysis）、基因突變檢測(如常用的SNP、CNV、QTL)、轉(zhuǎn)基因檢測（genetically modified organism，簡稱GMO，如檢測轉(zhuǎn)基因大豆、玉米、棉花等）及PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性驗(yàn)證分析（melt curve analysis、HRM assay）等多種研究應(yīng)用。

      CFX Connect所用的96×0.2mL PCR模塊的最大升溫降溫速度、模塊內(nèi)溫度均一性、溫度準(zhǔn)確度、退火溫度梯度優(yōu)化功能等PCR反應(yīng)模塊關(guān)鍵技術(shù)性能，與伯樂CFX96、CFX96 Touch 實(shí)時熒光定量PCR系統(tǒng)所用的反應(yīng)模塊保持一致，與AB 7500 Fast（96×0.1mL）、QuantStudio 5（96×0.2mL）和QuantStudio 6 Pro（96×0.2mL）的常用配置一致或接近。

伯樂-AB主流qPCR儀主要技術(shù)性能指標(biāo)對比

      從熒光檢測模塊類型看，CFX Connect、CFX96、CFX96 Touch和2020年新上市CFX Opus 96，都采用可移動、逐孔掃描的光梭式檢測單元。讀取熒光信號時，設(shè)定的熒光通道由光梭牽引動到每個反應(yīng)孔中心正上方并短暫懸停，完成熒光激發(fā)和反應(yīng)孔內(nèi)樣品發(fā)射熒光信號收集。光梭式檢測模式消除了反應(yīng)孔間的熒光交叉干擾（Cross-talk）和不同反應(yīng)孔與熒光探頭之間的角度和光程差。因此，反應(yīng)板不同位置的熒光測試信號無需ROX染料校正。這一點(diǎn)，所有CFX系列熒光定量系統(tǒng)相通。
      就檢測的靈敏度、動態(tài)范圍、可重復(fù)性這些關(guān)鍵性能而言，CFX Connect與CFX Opus 96、7500 Fast、QuantStudio 5、QuantStudio 6 Pro等多熒光通道平臺，并無本質(zhì)差異。
      CFX96、CFX96 Touch和CFX Opus 96配置的是6個熒光檢測通道（5熒光+1 FRET專用通道），而CFX Connect的檢測通道僅3個（2熒光+1 FRET通道）。但高低兩種光學(xué)配置的CFX系統(tǒng)，都有效支持SYBR Green I染料、TaqMan熒光探針（FAM、VIC、TET、HEX、CAL Fluor、Gold 540、Cal Fluor和Orange 560）、Molecular Beacon探針和1種FRET探針實(shí)驗(yàn)應(yīng)用。對實(shí)驗(yàn)者而言，CFX Connect檢測通道數(shù)量減少，犧牲的是多重實(shí)時熒光定量PCR分析中每個循環(huán)中可檢測靶標(biāo)的容量（單管內(nèi)可同時測定的熒光探針標(biāo)記靶標(biāo)種數(shù)從3-5種降低為2種）。但CFX Connect系統(tǒng)依然可以進(jìn)行FAM靶標(biāo)+VIC內(nèi)參組合這種最常見的雙重實(shí)時熒光定量分析（duplex qPCR）。而CFX Opus 96、7500 Fast、QuantStudio 5、QuantStudio 6 Pro這類多熒光通道配置平臺理論上可勝任三重、四重的多色熒光定量分析任務(wù)，這對于臨床醫(yī)學(xué)、流行病學(xué)中呼吸道、消化道感染性疾病復(fù)雜病原菌的快速鑒別固然有利。但眾所周知，3重及更多種靶標(biāo)的多重定量反應(yīng)實(shí)驗(yàn)，反應(yīng)體系的優(yōu)化與特異性、靈敏度驗(yàn)證工作十分繁瑣和復(fù)雜，絕非科研實(shí)驗(yàn)等閑事宜（多重實(shí)時熒光定量分析的涵義與應(yīng)用意義和實(shí)施方法的問題，可參考《如何用MIQE標(biāo)準(zhǔn)指導(dǎo)多重實(shí)時熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)的流程與驗(yàn)證設(shè)計?-上》）。從時間-效率比角度來說，CFX Connect的雙重?zé)晒舛糠治龉δ苁峭耆珜?shí)用、夠用的。這一點(diǎn)，目前已有大量實(shí)驗(yàn)論文可以證實(shí)（可參考《美人首飾侯王印盡是沙中浪底來——牛人用伯樂CFX connect實(shí)時熒光定量PCR儀都干了啥？-上》一文）。
      退一步說，對于特殊類型研究課題，確需開展單管內(nèi)多種模板測定分析時，另辟蹊徑，引入新型Green核酸染料高分辨率熔解曲線分析技術(shù)路線，CFX Duet完成5重以上的多重?zé)晒舛糠治鲆彩峭耆梢詫?shí)現(xiàn)的。
      至于CFX Connect實(shí)時熒光定量PCR儀明明配置了3個檢測通道數(shù)，為何只能進(jìn)行2色熒光同步檢測的問題，可參考《實(shí)時熒光定量PCR儀熒光檢測通道數(shù)量的內(nèi)涵淺析》一文，在此不作贅述。